La influencia de la fuerza iónica y la carga de la bicapa lipidica en la estabilidad de liposomas.
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Data publicació1997-01
EditorInstituto de Investigación Textil y Cooperación Industrial
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Abstract
Se investigó el efecto de incluir un agente inductor de carga negativa (ácido fosfatídico) en el potencial zeta y la agregación vesicular de grandes vesículas unilamelares liposómicas (LUV) en presencia de electrolitos neutros, con el fin de estudiar su estabilidad físico-química. Se prepararon suspensiones de liposomas por un método de evaporación por inversión de fase variando la fuerza iónica del electrolito. Los valores de potencial zeta se obtuvieron por microelectroforesis. Se encontró que las ecuaciones de Eversole y Boardman que relacionan la medida del potencial zeta con el espesor de la doble capa eléctrica eran válidas en todos los casos. Se estimaron las densidades de carga superficial de estos liposomas, usando los valores de potencial de superficie calculados de esta ecuación. Las composiciones de lípido usados fueron fosfatidilcolin/ácido fosfatídico (PC:PA) 10:0, 9.5:0.5, 9.0:1.0 y 8.0:2.0 relaciones molares. Los electrolitos usados fueron Na2SO4, NaCI y NaBr, en el rango de concentración de 1.0 a 150 mM , usando una solución buffer (pH=7.20) a 25°C. La densidad de carga superficial obtenida de las determinaciones de potencial zeta aumentó cuando la concentración de electrolito en el medio acuoso, aumentó, en todas las composiciones lipídicas PC:PA ensayadas, siendo los valores más altos obtenidos para el NaBR y los más bajos para el Na2SO4. Se obtuvieron tendencias similares en experimentos ensayando la influencia de las sales investigadas en la estabilidad de los liposomas con respecto a la agregación a
diferentes composiciones lipídicas PC:PA. Las mediciones de estabilidad se hicieron determinando las alteraciones en la distribución del tamaño de la vesicula, el grado de oxidación del lípido y la posible
hidrólisis de los componentes fosfolípidos de las suspensiones de liposoma en función del tiempo. The effet of including a negative charge-inducing agent (phosphatidic acid) on the zeta potential and vesicle aggregation of large unilamellar vesicle liposomes (LUV) in the presence of neutral electrolytes was investigated with the aim of studying their physicochemical stability. Liposome suspensions were prepared by a reverse phase evaporation method varying the ionic strength of electrolyies. Zeta potential values were obtained by microelectrophoresis measurements. The Eversole and Boardman equations which relate the measured zeta potential to the thichmess of the electrical double layer was found to be valid in all cases. The surface charge densities in these liposomes were estimated using the surface potential values calculated from this equation. The lipid compositions used were phosphatidyl-choline/phosphatidic acid (PC:PA) 10:0, 9.5:0.5, 9.0:1.0 and 8.0:2.0 molar ratios. The electrolytes used were Na2SO4, NaCI, and NaBr in the range of concentrations from 1.0 to 150 mM using a buffered solution (pH 7.20) at 25°C. The surface charge density obtained from the zeta potential determinations increased when the electrolyte concentration in the aqueous medium increased, in all the PC:PA lipid compositions tested, the highest values being obtained for the NaBr and the lowest for the Na2SO4. Similar tendencies were obtained from experiments testing the influence of the investigated salts on liposome stability with respect to the aggregation at different PC:PA lipid compositions. Stability measurements were made determining the alterations in the vesicle size distribution, the lipid oxidation level, and the possible hydrolysis of the phospholipid components of liposome suspensions as a function of time. Nous avons estudié l'effet de l'incorporation d'un agent inducteur de charge négative (acide phosphatidique) au potentiel zêta et l'agrégation vésiculaire de grandes vésicules unilamellaires liposomiques (LUV) en présence d'electrolytes neutres, pour étudier leur stabilité physico-chimique. Nous avons préparé des suspensions de liposomes selon une méthode d'évaporation par inversion de phase en modifiant la force ionique de l'électrolyte. Les valeurs du potentiel zêta ont été obtenues par micro-électrophorese, Nous avons vérifié que les équations d'Eversole et de Boardman, qui établissent une relation entre la mesure du potentiel zêta et l'épaisseur de la double couche électrique, étaient valables dans tous les cas.
Nous avons évalué les densités de charge superficielle de ces liposomes, en utilisant les valeurs de potentiel de surface, calculées dans cette équation. Les compositions de lipide utilisées ont été phosphatidilcholine/acide phosphatidique (PC:PA) 10:0, 9.5:0.5, 9.0:1.0 et 8.0:2.0, rapports molaires. Les électrolytes utilisés ont été Na2SO4, NaCI et NaBr, sur le rang de concentration de 1 à 150 mM, en utilisant une solution buffer (pH=7,20) a 25°C. La densité de charge superficielle obtenue des déterminations de potentiel zêta a augmenté quand la concentration de l'électrolyte, dans le milieu aqueux, a augmenté dans toutes les compositions lipidiques PC:PA testées, les plus fortes valeurs obtenues correspondant à NaBr et les plus faibles à Na2SO4. Des tendances similaires sont apparues dans les expériences réalisées pour tester l'influence des sels objet de la recherche sur la stabilité des liposomes par rapport à l'agrégation a différentes compositions lipidiques PC:PA. Les mesures de stabilité ont été prises en déterminant les modifications dans la distrbution de la taille de la vésicule, le degré d'oxydation du lipide et l'hydrolyse possible des composants phospholipides des suspensions de liposome en fonction du temps.
CitacióCarrión Fité, Francisco Javier; Maza y Ribera, Alfonso de la; Parra, José Luis. La influencia de la fuerza iónica y la carga de la bicapa lipidica en la estabilidad de liposomas. Boletín del Instituto de Investigación Textil y de Cooperación Industrial, 1997, nº 111, p. 21-31.
ISSN1131-6756
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